PBS缓冲液配制,pbs缓冲液配制方法

('PBS缓冲液配制0.01M磷酸盐缓冲液（PBS）配制方法称取8gNaCl、0.2gKCl、1.44gNa2HPO4和0.24gKH2PO4,溶于800ml蒸馏水中，用HCl调节溶液的pH值至7.4，最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌（至少20分钟），保存存于室温或4℃冰箱中。需要注意的是，通常所说的浓度0.01M指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度，而非Na离子或K离子的浓度，Na离子和K离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话，则需要在配置的时候分别加入100u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。NaCl8.0g；KCl0.2g；Na2HPO41.44g；KH2PO40.24g；加蒸馏水至1000ml，调节pH到7.4（用Na2HPO4或KH2PO4调节）。用于免疫反应时可加入0.1%叠氮钠（0.1g/100mlPBS）;当试剂中含有辣根过氧化物酶时，严禁使用叠氮钠，可改用0.01%柳硫汞。PBS缓冲液配方PH7.67.47.27.0H2O1000100010001000NaCl8.58.58.58.5Na2HPO42.22.22.22.2NaH2PO40.10.20.30.4根据经验来看，新鲜配置的PBS搅匀后其PH值约在7.2-7.4之间，可是在温度的影响下，尤其在夏天，其电离常数发生了改变，在经过昼夜的时间后，PH值会明显改变（我亲自测过偏酸）。所以做实验的同学可要注意了，PH值可能会影响实验结果，甚至可能导致阴性。所以务必记得这个时候和天气，要加强实验条件控制问题。每次使用前最好用试纸测一下过夜了的PBS，如果发生偏酸或偏碱，注意重新换新液。PBS缓冲液称取NaCl8g，KCl0.2g，Na2HPO4•12H2O3.63g,KH2PO40.24g，溶于900ml双蒸水中，用盐酸调pH值至7.4，加水定容至1L，常温保存备用。PBST缓冲液取300μlTween-20加入PBS100ml中，混匀后即刻使用。现用现配。如果是把所有固体加大十倍，配置为浓缩液，工作时候十倍稀释，那么，在刚配好浓缩液时，PH在6.5左右，明显偏酸。不能用盐酸调。虽然可以用氢氧化钠颗粒调，但是有更方便的方法。十倍稀释以后，PH自动升高到所需要的值。不需要其它任何处理。这个可以先取少量试一试，配好之后再测一次~PH8.0的PBS配方详细1.NaCl137mmol/L，KCl2.7mmol/L，Na2HPO44.3mmol/L，KH2PO41.4mmol/L2.向烧杯中加入约800ml的去离子水，充分搅拌溶解。3.滴加浓盐酸将pH值调节至8.0，然后加入去离子水将溶液定容至1L。4.高温高压灭菌后，室温保存。注意：上述PBSBuffer中无二价阳离子，如需要，可在配方中补充1mMCaCl2和0.5mMMgCl2。0.05mol/LPBS(磷酸缓冲液PhosphateBufferSolution，PBS)的配制：甲液：0.05mol/LNa2HPO4溶液：称取磷酸氢二钠9.465g7.099g,加蒸馏水至1000ml;乙液：0.05mol/LKH2P04溶液:称取磷酸二氢钾,9.07g6.803g,加蒸馏水至1000m1。将甲乙液分装在棕色瓶内，于4℃冰箱中保存，用时甲、乙两液各按不同比例混合，即可得所需pH的缓冲液,见下表:pH甲液ml乙液mI5.292.597.55.595.095.05.9110.090.06.2420.080.06.4730.070.06.6440.060.06.8150.050.06.9860.040.07.1770.030.07.3880.020.07.7390.010.08.0495.05.0你要配制pH=6.8的PBS，可用甲、乙液各50ml混合即可。',)