遗传学实验--果蝇唾腺染色体的压片及其观察

('果蝇唾腺染色体的压片及其观察一、实验目的1、练习果蝇唾液腺的分离方法2、学会制作唾腺染色体压片3、观察了解果蝇唾液腺染色体的形态特征二、实验材料黑腹果蝇的三龄幼虫，活跃的，雌性幼虫。盖玻片、载玻片、解剖针、解剖镜、45%醋酸溶液、卡宝—品红染液、盐酸、乳酸醋酸溶液三、实验原理唾腺染色体的特点：大、粗。唾腺细胞是一个处于间期的细胞，染色体处于一个伸展的状态，所以特别长，因为这个唾腺细胞是一个多倍体的细胞，每条染色体的话有1000到4000条核蛋白纤维丝（包括DNA和蛋白质）。唾腺染色体的所有的着丝粒聚在一起形成了一个染色中心，伸开五条臂。X染色体体联会在一起。果蝇染色体分区：果蝇染色体一共分为120个区，从端部开始1-20为x染色体，21-40在第二染色体的左臂，61-80在第三染色体的左臂，101—102位于点状染色体。右臂是从基部开始分区，41-60在第二染色体的右臂，81-100位于第三染色体的右臂。每一个分区里边又分成段这个段，用A、B、C、D来表示。四、实验步骤唾液腺制片：1、取一张载玻片，擦干净表面的酒精，放在解剖镜的载物台上。2、打开解剖镜，使用上光源。并在载玻片上滴一滴生理盐水。3、用解剖针取一只黑腹果蝇的三龄幼虫。4、用一支解剖针固定幼虫头部，另外一支解剖针压入口沟的位置，将其拉断。找到口沟附近的一对透明的唾液腺，将唾液腺留在中间，用吸水纸将其他的部分擦去。5、加入45%的醋酸溶液固定，时间为5—7秒。让唾液腺离开原来的位置，时间到了之后将多余的液体吸掉。6、加一滴盐酸起软化作用，再加一滴蒸馏水洗去多余的盐酸，时间大概1—2秒。让唾液腺离开原来的位置。7、滴加染液，染色三十分钟。8、重新做一张制片9、吸掉多余的染液，加一滴乳酸醋酸溶液，将唾液腺充分的洗涤。吸去多余的溶液。10、盖上盖玻片，用两层滤纸，中间打折压住盖玻片手点住盖玻片的两个角轻轻的按抚，吸去多余的溶液。11、压片显微镜观察：先在低倍镜下观察，找到分散好的染色体图像，再高倍镜观察。用显微镜可以看到四对染色体，第一对染色体(X-)组成一个长条,第二和第三对各自组成了具有左右两臂的染色体对，它们都以中部的着丝区聚集，而第四对染色体很小，分布在着丝区呈点状或盘状。这样，从压好的较为模式的片子中便可看到五条弯曲展开的染色体臂(X-、IL、IR、IL、MR)，和一个点状的第四染色体对，它们在着丝区构成染色中心并向四周伸开。五、注意事项1、染色需要染30—40分钟，可以时间更长些。2、染色后洗染液时，要洗到唾腺周围不会渗染液了为止。3、压片的时候不要使劲地敲，要朝一个方向力度的，朝一个方向推，既有向下的力量，又有向侧面的方向。4、可以多做几张片子，进行多次观察。',)